Thành phần:
-Acide Citric
-Tri-Sodium citrate
-Dextrose
-ED vừa đủ: 1.5 ml
Hướng dẫn qui trình tách PRP ly tâm hai lần
Bước 1: Để ống nghiệm về nhiệt độ phòng 5-10 phút trước khi lấy máu.
Bước 2: Lấy máu bệnh nhân bằng bơm tiêm 10 ml hút 8,5 ml hoặc bằng kim bướm ống chân không.
Bước 3: Bơm máu theo nhẹ theo thành ống nghiệm đúng 8,5ml. Có dùng lượng máu thể ít hơn nhưng không được quá 8,5ml hoặc dùng hệ thống lấy máu chân không hút cho đến khi máu không hút được nữa nếu lấy thêm máu đưa ống vào holder màu vàng chọc kim vào ống lấy lần 2
Bước 4: Đảo ống nghiệm từ 8-10 lần theo chiều lên xuống và xoay tròn.
Bước 5: Để yên 5-10 phút nhiệt độ phòng
Bước 6: Tiến hành
ly tâm lạnh ở tốc độ 2000-2500 vòng/10 phút. Nếu không có máy ly tâm lạnh có thể dùng các tube falcon chứa nước bỏ tủ lạnh để làm giảm nhiệt độ lúc ly tâm. Chú ý cân bằng.
Bước 7: Tách ngay lớp huyết tương PRP và PPP vào tube falcon 15 ml vô trùng bằng dụng cụ vô trùng như pipet 3.0ml vô trùng hoặc đầu cone vô trùng
Bước 8: Ly tâm
mạnh lần 2 tốc độ 3200 v/phút trong 10 phút
Bước 9: Hút ngay 1/3 huyết tương thu thập được trên cùng cho vào tube 2.0 ml ( huyết tương nghèo tiểu cầu PPP) Tách huyết tương giàu tiểu cầu PRP ở vị trí 2/3 dưới của huyết tương.
Tuỳ theo mục đích sử dụng có thể kích hoạt tiểu cầu hay không bằng thrombin hay CaCl
2 ( nên sử dụng các thành phần không gây hiện tương dị ứng. Tiểu cầu được kích hoạt sẽ phóng thích các yếu tố tăng trưởng tiểu cầu vào huyết tương. Quá trình kích hoạt huyết tương sẽ hình thành sợi fibrin.
Bước 10: Cho CaCl
2 tỉ lệ thể tích 1:20 huyết thanh và CaCl
2 Vào ống trộn đều.
Bước 11: Ủ nhiệt độ 37
0C trong 10-15 phút hay nhiệt độ phòng 15-20 phút.
Bước 12: Vortex nhanh bằng máy vortex 30s hoặc trộn nhiều lần huyết thanh bằng pipet
Bước 13: Quay ly tâm 3200 v/phút/5 phút
Bước 14: Tách hết huyết thanh (tránh cặn) cho vào tube vô trùng lưu trữ hoặc sử dụng.
Lưu ý:
-Bảo quản lạnh tube acd 2-4
0C, hoặc có thể đóng băng khi sử dụng không thường xuyên
- Tốc độ ly tâm là yếu tố quan trọng trong quá trình tách. Vì vậy, cần lựa chọn máy ly tâm có tốc độ quay chính xác và chống run lắc làm ảnh hưởng đến chất lượng tiểu cầu.
-Máu thu thập không được huyết tán. Nếu có phải lấy lại. Tuyệt đối không hút nhầm bạch cầu và hồng cầu, nếu có phải lăp lại bước 6.
Khuyến cáo: Phát hiện chảy dung dịch ra ngoài hoặc bất thường khác do vận chuyển, bảo quản...
không được sử dụng dưới bất cứ hình thức nào lập tức thông báo cho nhà cung cấp để đổi ống khác.
-Việc tiêm PRP trên khớp cần thận trọng trong các điều kiện vô trùng tuyệt đối.
-Thông báo cho bác sỹ các tác dụng phụ (nếu có) không mong muốn, hoặc dị ứng với các thành phần của ống.